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饲料中真蛋白的检测方法

详细介绍

饲料中真蛋白的检测方法

一、测定原理

饲料蛋白质经沸水提取并在碱性溶液中被硫酸铜沉淀。过滤和洗涤后,可将纯蛋白质和非蛋白质含氮物分离,再用凯氏定氮法测定沉淀物中的蛋白质含量。

二、仪器设备

(1)烧杯:200ml

(2)定型滤纸

(3)其他设备与粗蛋白质测定法相同

三、试剂与配制

(1)100g.L-1硫酸铜溶液;分析纯硫酸铜(5水硫酸铜)10g溶于100ml水中

(2)25g.L-1氢氧化钠溶液:将2.5g分析纯氢氧化钠溶于100ml水中

(3)10g.L-1氯化钡溶液:1g氯化钡溶于100ml水中

(4)2mol.L盐酸溶液

(5)其他试剂与粗蛋白质测定法相同

四、测定步骤

准确称取试样1g左右(精确至0.0001g)置于200ml烧杯中,加50ml水中,加热至沸。

加入20ml硫酸铜溶液,20ml氢氧化钠溶液,用玻璃棒充分搅拌,放置1h以上。用定性滤纸过滤,然后用60~80摄氏度热水洗涤沉淀5或6次,用氯化钡溶液5滴和盐酸溶液1滴检查滤纸,直至不生成白色硫酸钡沉淀为止。将沉淀和滤纸放在65摄氏度烘箱干燥2h,然后全部转移到凯氏烧瓶中,按半微量凯氏定氮法进行氮的测定。


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